Développement d'un bioessai basé sur l'activation de récepteurs membranaires aux estrogènes couplés aux protéines G (GPER) identifiés chez Dicentrarchus labrax pour la détection de perturbateurs endocriniens à activité estrogénique

Les perturbateurs endocriniens à activité estrogénique (EEDC) constituent une véritable menace pour l'environnement et la santé humaine. Ils nécessitent le développement de nouvelles méthodologies pour les détecter afin de limiter leurs émissions dans les milieux naturels. Dans ce contexte, nous avons proposé un nouveau bioessai, le test DLES (Slaby et al., 2024). Ce dernier repose sur l'utilisation d'un gène rapporteur placé sous le contrôle de l'activation des trois récepteurs nucléaires aux
estrogènes du bar Européen (sbEsr1, sbEsr2a, sbEsr2b ; Dicentrarchus labrax). Chez D. labrax, en plus des trois récepteurs nucléaires, la voie des estrogènes est médiée par des récepteurs membranaires couplés aux protéines G (GPER1 et GPER2). Les GPER activent une voie de signalisation intracellulaire via la cascade des Mitogen-activated protein kinases (MAPK) qui aboutira à une réponse biologique non génomique rapide et à une modification de l’expression des gènes présentant au niveau de leurs promoteurs un élément de réponse à l’adénosine monophosphate cyclique. En raison des sensibilités différentes entre récepteurs et dépendantes du ligand, l'intégration de ces GPER dans le test DLES permettrait d'améliorer les capacités de détection du bioessai. Basé sur un travail précédent (Zapater et al., 2024), l'objectif du stage sera de participer à la mise au point et à la validation d'une lignée cellulaire stable permettant l'étude de l'activation des GPER pouvant être utilisée dans un contexte de biosurveillance des milieux aquatiques. Cette extension du test DLES sera ensuite employée pour l'analyse d'échantillons environnementaux.
Le ou la stagiaire participera activement aux expérimentations de mise au point et de validation et devra donc avoir bénéficié d'une première expérience en laboratoire (idéalement en culture cellulaire). Il ou elle sera amené(e) à traiter des données à l'aide d'outils statistiques et graphiques.